martes, 9 de julio de 2013

TRABAJO PRÁCTICO: EXTRACCÍON DE ADN

OBJETIVO: extraer moléculas de ADN de células animales y observar al microscopio

PRIMERA PARTE: MATERIALES PARA CADA COMISÍON


  • UN HÍGADO DE POLLO O UNA BANANA
  • UN MORTERO CON PILÓN
  • 2 VASOS DE PRECIPITADOS
  • UNA PIPETA
  • UNA PROBETA DE 100 ml
  • UN EMBUDO
  • 10 g DE CINa (clorulo de sodio= sal) 
  • 50 ml DE ALCOHOL ETÍLICO
  • 1 ml DE DETERGENTE DE COCINA 
  • UN PUÑADO DE ARENA
  • UN TROZO DE TELA (aproximadamente 20x20 cm) 











PROCEDIMIENTO:

  1. Colocar el hígado de pollo o la banana en el mortero. Añadir arena y triturar.    
     
  2. Agregar 50 ml de agua, triturar y mezclar hasta formar una papilla 



  3. Filtrar el triturado varias veces con una tela para separar los restos de tejidos.  

  4. Colocar el filtrado en un vaso de precipitados.



     
    5. Disolver 1o g de sal en 100 ml de agua. 







    6.Añadir el filtrado un volumen igual de solución salina. 







       
    7.Agregar a la mezcla 1ml de detergente de cocina. 
      


  5. 8.Medir 50 ml de alcohol etílico con la pipeta y añadirlos con cuidado, sobre las paredes internas del vaso. 




  6.   9.Revolver la mezcla con la varilla de vidrio 

       10. Se observará que sobre la varilla de vidrio se adhieren fibras de color blanco: son agrupaciones de varias moléculas de ADN.







    SEGUNDA PARTE:


    •     MICROSCOPIO ÓPTICO

    •     COLORANTE PARA MICROSCOPÍA (hematoxilina o azul de metileno)

    •     PORTA Y CUBREOBJETOS 


    1.   Tomar una muestra de ADN adherido a la varilla y colocarla sobre un porta objetos. 






       2.Agregar unas gotas de hematoxilina ( o azul de metileno) para confirmar la presencia de ADN y dejar actuar unos minutos. 
      3. Cubrir la muestra y observar al microscopio 
       
         


       Dibujar la estructura aparente de ADN.